柠檬酸,又名枸橼酸,是一种重要的有机酸,为无色晶体,无臭,有很强的酸味,易溶于水,是酸度调节剂和食品添加剂。柠檬酸多为发酵产品,发酵使用的菌株为黑曲霉,是曲霉属真菌中的一个常见菌种。
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正常的柠檬酸发酵培养基中除发酵菌株黑曲霉外粘染其他微生物,称为染菌。生产的全部过程中带入杂菌的途径很多,有人员操作、设备卫生、原辅料、 环境卫生等。
操作人员要有无菌意识,要掌握基本的微生物学知识,可以熟练做消毒和灭菌操作。柠檬酸发酵有必要进行各种灭菌操作,例如定期对发酵罐进行空消,每罐培养基要进行实消,无论是发酵罐空消还是培养基实消,操作人员都要严格按照灭菌温度和压力进行操作。
柠檬酸发酵多为二级培养,原种需要先经过种子罐扩培,种子罐在培养过程中也容易受到微生物污染。正常的情况下,种子罐在接入发酵罐前要进行杂菌检查,染菌的种子罐不能使用。
柠檬酸发酵过程中主要辅料有尿素、硫酸铵、 泡敌、糖化酶等。一般营养盐等辅料都在培养基实消前加入,这样在培养基实消时就可以把辅料中的杂菌一并杀死。柠檬酸发酵过程中由于培养基的特性和通风培养,发酵液容易起泡,严重时会出现漫罐,尤其在黑曲霉生长的对数期,黑曲霉代谢旺盛, 一般每隔几分钟就要加一次消泡剂。消泡剂需要在发酵培养过程中加入,因此消泡剂和相关的管道如果灭菌不彻底,非常容易导致发酵染菌。
柠檬酸为好氧发酵,发酵过程中需要持续通风,保证发酵液中的溶氧能够很好的满足黑曲霉生长需要。因此压缩空气需要经过过滤除菌后通入发酵罐,过滤器安装不正确使用或使用前灭菌不彻底都会造成发酵染菌。
柠檬酸发酵过程中产生大量的热量,发酵罐一般都会采用内置盘管,使用循环水进行发酵温度控制, 由于消罐产生振动,在使用的过程中,循环水的盘管焊缝会出现开焊或渗漏,造成循环水进入发酵液, 进而污染发酵液,造成发酵染菌。另外柠檬酸发酵采用培养基实消,培养基中的蛋白质等有机物在受热条件下容易变性结垢,而且发酵罐内盘管、搅拌、检测探头等部件较多,结垢容易附着在这些部件上,若无法及时清洗整理,结垢会滋生杂菌,且结垢包夹可能会引起蒸汽加热灭菌不彻底,造成发酵染菌。
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